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上海旦鼎 流式細胞儀使用方法(二)
更新時間:2019-08-24   點擊次數:2221次

通過預設的獲取模式文件進行樣品分析
 

  1.從蘋果標志中選擇CELLQUEST,新視窗出現后從File指令欄中選擇Open,打開預設的獲取模式文件。

  2.從屏幕上方Acquire指令欄中,選取Connect to Cytometer進行電腦和儀器的連機。將出現的Acquisiton 

  Control對話框移至合適位置。

  3.從Cytometer指令欄中選取Instrument Settings,在其對話框中選擇Open以調出以前存儲的相同實驗的儀器設定,按Set 確定。

  4.在Acquire指令欄中,選擇Acquisition&Storage決定儲存的細胞數,參數,信號道數。其中Resolution在做細胞表面標志時選擇256,做DNA時選擇1024。Parameter 

  Saved…則根據不同的檢測對象選擇不同的參數。

  5.在Acquire指令欄中,選擇Parameter 

  Description,以決定文件存儲位置(folder),文件名稱(file),樣品代號以及各種參數的標記(panel),即安排tube1,2,3…的檢測參數。一般本儀器獲取的數據按照檢測對象的不同分別儲存于FACStation 

  G3\BD Applications \CELLQuest \IMM 和DNA 文件夾中。文件根據日期命名。

  6.在Cytometer指令欄中,選擇Counters,將此對話框移至合適位置,以便于隨時觀察events計數。

  7.將樣品試管放至檢測區,在Acquire Control對話框中選取Acquire以啟動樣品分析測定。

  8.微調儀器設定,待細胞群分布合適后選擇Acquire Control對話框中Pause, Abort, 

  去除Setup前的“?”,開始正式獲取信號,存儲數據。

  9.當一定數目的細胞被測定后,獲取會自動停止,并會自動存儲數據。重復步驟7,繼續分析下一個樣品,直到所有的樣品數據分析完畢。

  ?當所有樣品分析分析完畢,即換上三蒸水,并將流式細胞儀置于“STANDBY”狀態,以保護激光管。
 

  五.關機程序:
 

  1.從File中選擇Quit, 退出軟件,選擇Don’t Save至蘋果屏幕。

  2.用4ml 1:10稀釋的漂白水作樣品,將樣品置于旁位(vacuum is on),以外管吸去約2ml,在將樣品架置于中位(vacuum is 

  off),再HIGH RUN 5分鐘(內管吸去2ml)。

  3.改用三蒸水4ml作樣品,同上處理。

  4.按Prime三次。

  5.此時儀器自動轉為STANDBY狀態,換2ml三蒸水。必須在儀器處于“STANDBY”狀態 

  10分鐘后再依次關掉計算機、打印機、主機、穩壓電源,以延長激光管壽命,并確保應用軟件的正常運行。

  6.填寫使用登記表。

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