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旦鼎談 核酸提取儀原理和注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2020-02-19   點(diǎn)擊次數(shù):2628次

核酸提取儀核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)使得樣本核酸提取工作自動(dòng)完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制中心、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究以及畜牧業(yè)等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。

 

磁珠法核酸提取儀的基本原理

磁珠法核酸提取儀通常包括磁棒法和抽吸法。

1. 磁棒法

磁棒法是利用磁珠的轉(zhuǎn)移,液體的固定來(lái)使核酸的分離得以實(shí)現(xiàn)。其和抽吸法的原理和過(guò)程相同。磁珠和液體分離的方式有差異。磁棒法是通過(guò)磁棒對(duì)磁珠的吸附從廢液中分離開(kāi)磁珠,在下一步的液體中將其放入,使核酸的提取得以實(shí)現(xiàn)。

 

 

2.抽吸法

抽吸法又稱為移液法,,是利用液體的轉(zhuǎn)移或者磁珠的固定來(lái)使核酸的提取得以實(shí)現(xiàn)的。通常利用對(duì)系統(tǒng)控制機(jī)械臂的操作來(lái)實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)移,有如下提取過(guò)程:

1) 裂解:

將裂解液加入到樣品中,利用機(jī)械運(yùn)動(dòng)及加熱來(lái)混勻反應(yīng)液和使反應(yīng)充分。裂解細(xì)胞,使核酸釋放出來(lái)。

 

2) 吸附:

將磁珠加入到樣品裂解液中,充分混勻,通過(guò)磁珠在高鹽低PH值下對(duì)核酸親和力很強(qiáng)的特點(diǎn),對(duì)核酸吸附,在外加磁場(chǎng)作用下,分離磁珠與溶液,通過(guò)吸頭轉(zhuǎn)移到廢液槽中,棄掉吸頭。

 

3) 洗滌:

將外加磁場(chǎng)撤去,使用新吸頭將洗滌緩沖液加入,充分混勻,將雜質(zhì)去除,在外加磁場(chǎng)作用下,移出液體。

 

4) 洗脫:

將外加磁場(chǎng)撤去,使用新吸頭將洗脫緩沖液加入,充分混勻,結(jié)合的核酸就和磁珠分離,從而使純化的核酸獲得。

 

注意事項(xiàng)

1.核酸提取儀至少離其他豎直面10cm。

2.儀器的輸入電源線必須接地以防止觸電事故。

3.操作人員不可以擅自對(duì)儀器進(jìn)行拆解,必須有持證的專業(yè)維修人員完成更換元件或進(jìn)行機(jī)內(nèi)調(diào)節(jié)等操作,當(dāng)接通電源時(shí),不要更換元件。

4.相對(duì)濕度10%-80%、暢通流入的空氣為35℃或以下,正常的大氣壓(海拔高度應(yīng)該低于3000m)、溫度20-35℃、典型使用溫度25℃為儀器的安裝環(huán)境。

5.不要在如電暖爐等靠近熱源的地方放置儀器應(yīng)當(dāng)防止將水或者其他液體濺入電子元件中以避免短路。

6.進(jìn)風(fēng)口和排風(fēng)口均在儀器背面的位置,同時(shí)同時(shí)防止在進(jìn)風(fēng)口聚集灰塵或纖維,風(fēng)道保持暢通。

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